产品货号：
BTN71206
中文名称：
柱式动物DNA提取试剂盒
英文名称：
Animal DNA column extraction kit
产品规格：
50T
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒主要用于快速提取新鲜或冷冻的动物组织中的基因组DNA，提取得到的DNA可直接用于PCR、酶切、杂交等后续反应。
保存：室温，有效期1年。
动物DNA纯化溶液A容易产生沉淀，动物DNA纯化溶液B十分粘稠，用前均需要在65℃水浴中加热使沉淀溶解或粘稠度降低，用前充分摇匀。
相关搜索：柱式动物DNA提取试剂盒，动物DNA提取，Animal DNA column extraction kit
- DNA更加纯净，大多数DNA样品的OD260/280值在1.8～1.9之间。
- DNA产率一般在200μg/g左右(跟组织种类密切相关)。
- 操作更加简单，离心吸附操作代替离心沉淀，整个过程室温操作约10分钟，适合大规模样品处理。
- 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
| 组分 | 规格 |
| 动物DNA纯化溶液A | 40mL |
| 动物DNA纯化溶液B | 20mL |
| 动物DNA纯化溶液C | 50mL |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50mL |
| DNA洗脱液 | 10mL |
保存：室温，有效期1年。
动物DNA纯化溶液A容易产生沉淀，动物DNA纯化溶液B十分粘稠，用前均需要在65℃水浴中加热使沉淀溶解或粘稠度降低，用前充分摇匀。
- 根据使用材料的不同进行下列操作：
- 对贴壁细胞：吸尽培养液，在每10平方厘米细胞中加入0.8mL预热的动物DNA纯化溶液A，用枪充分吹打以确保细胞全部裂解，然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。
- 对悬浮细胞：离心收集细胞，吸尽液体，在每1～5×106悬浮细胞中加入0.8mL预热的动物DNA纯化溶液A，用枪充分吹打以确保细胞全部裂解。然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。如果是fibroblasts或carcinoma细胞，0.8mL动物DNA纯化溶液A的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
- 对新鲜或冷冻的组织：先将剪切成小块的新鲜组织或冷冻保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中，每50～100mg组织加0.8mL预热的动物DNA纯化溶液A，用剪切式匀浆器匀浆30秒左右，然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织（细胞中含大量正在复制的DNA），建议组织的使用量不要超过50mg。
- 对非冻型DNA保存液保存的组织：先用纸吸去保存液后再剪切成小块，其余操作同新鲜或冷冻组织的处理。
- 对贴壁细胞：吸尽培养液，在每10平方厘米细胞中加入0.8mL预热的动物DNA纯化溶液A，用枪充分吹打以确保细胞全部裂解，然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。
- 加入0.4mL预热的动物DNA纯化溶液B到裂解液中。由于动物DNA纯化溶液B十分粘稠，可将1mL枪头剪掉一截再用，也可以用称量方法加0.4g。加入动物DNA纯化溶液B后需要颠倒数次充分混匀。
- 65℃水浴5～10分钟。如果室温放置，DNA产量将降低10～20%。
- 加入0.2mL自备氯仿，振荡器上充分振荡混均30秒，此时溶液将呈乳白色。
- 一定要确保离心管底的液体被震荡起来。
- 12000～15000g室温离心2分钟。上清透明，中间层为白膜（蛋白层）。
- 小心将上清液平均转移到两个新的离心管中，避免触及中间的白膜。
- 每个管中加入1.5倍体积的动物DNA纯化溶液C，充分颠倒混匀。
- 分两次上柱，即先转移一半的混合液到离心吸附柱中，室温放置2分钟，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液，然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中，室温放置2分钟，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
- 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
- 加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
- 12000～15000g室温再离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
- 室温放置半分钟使残留乙醇挥发。
- 将离心吸附柱转移到一新的1.5mL塑料离心管中，加入50～100μL DNA洗脱液，室温放置离心吸附柱1～2分钟。
- 12000～15000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为DNA样品，可以立即使用或存放于冰箱待用。
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